Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia (HPLC): introducción, conceptos y aplicaciones

Docentes:

Dra. Pamela Quintas (Inv. Asistente y JTP – Instituto Interdisciplinario de Ciencias Básicas -ICB-CONICET/UNCUYO). Docente Responsable del curso
Dra. Cecilia Castells (LIDMA-CIC-Facultad de Ciencias Exactas-UNLP)
Dr. Emiliano Fiorentini (Inv. Asistente – Ingresante CIC 2022- y Ayudante de primera simple- Instituto Interdisciplinario de Ciencias Básicas -ICB-CONICET/ UNCUYO).
Dr. Marcelo Pereyra (Profesional Principal y Profesor – INSTITUTO DE QUIMICA DEL SUR – INQUISUR-CONICET-Universidad Nacional del Sur)
Dra. Roxana González (Profesional INTA EEA La Consulta, Auxiliar de primera FCEN-UNCUYO)

Duración: 30 horas

Fecha de realización: del 8 al 12 de julio del 2024

Fecha de pre-inscripción: del 6 al 26 de mayo de 2024

Modalidad: virtual mediante la plataforma ZOOM

Resumen del curso:
La Cromatografía Líquida de Alta Performance (HPLC) es una de las técnicas analíticas más difundidas en todas las ramas de las ciencias químicas, bioquímicas, biológicas, bromatológicas y ambientales, y actualmente se ha convertido en una herramienta indispensable en la química analítica. En el curso se desarrollarán los conceptos y fundamentos básicos teóricos de las separaciones cromatográficas, se describen los componentes del sistema de equipamiento básico, las distintas modalidades cromatográficas y el pretratamiento de muestras tanto líquidas como sólidas, así como su aplicación en el análisis cualitativo, terminando con la discusión de distintos ejemplos de aplicación en diversas muestras complejas.

Objetivo general:

Consolidar el conocimiento sobre una de las técnicas analíticas más utilizadas en la química analítica, la Cromatografía Líquida de Alta Performance (HPLC).

Objetivos específicos:

• Conocer los fundamentos de la cromatografía líquida.
• Describir y analizar la función de cada uno de los elementos que integran un
cromatógrafo líquido básico.
• Conocer distintas técnicas para el tratamiento adecuado de muestras.
• Aprender acerca de la versatilidad y ventajas de HPLC.
• Estudiar las cifras de mérito involucradas en el desarrollo de un método analítico.
• Aprender acerca de las aplicaciones de HPLC.
• Explicar el resultado de la cromatografía liquida de alta resolución.

Programa del curso:

Módulo 1 (6 hs.): Pamela Quintas y Roxana González
Introducción. Fundamentos de la cromatografía. Tipos de cromatografía. Concepto de plato teórico. Resolución. Eficiencia de la columna. Factores de ensanchamiento debanda. Cinética de la transferencia de masa entre la fase móvil y la fase estacionaria. Ecuación de van Deemter. Factor de capacidad. Elección de los parámetros de columna.
Módulo 2 (4 hs.): Pamela Quintas
Descripción del equipamiento básico. Tipo de Bombas. Tipo de inyectores. Detectores más comunes: UV-visible, arreglo de diodos, fluorescencia, índice de refracción, electroquímico, dispersión de luz y detector de masas. Fase móvil: características, tratamiento y aditivos.
Módulo 3 (5 hs.): Cecilia Castells
Tipos de cromatografía: cromatografía de partición, líquido-líquido y de fase unida. Teoría. Rellenos. Fase normal y fase reversa. Solventes y columnas. Cromatografía de intercambio iónico. Fundamentos. Rellenos. Solventes. Selección del relleno. Selección de las condiciones de operación. Cromatografía de pares iónicos. Factores que controlan la retención. Solventes y columnas. Cromatografía de exclusión por tamaño. Fundamento. Relleno. Fase móvil.
Módulo 4 (4 hs.): Emiliano Fiorentini
Preparación de la muestra: tipos de muestra. Pretratamiento de muestras sólidas y líquidas. Extracción en fase sólida (SPE), acelerada con solventes (ASE) y con microondas (MASE). Microextracción en fase sólida (SPME) y microextracción
dispersiva líquido-líquido (DLLE). Derivatización. Clean-up.
Módulo 5 (5 hs.): Marcelo Pereyra
Análisis cuantitativo: detectabilidad. Influencia de las condiciones experimentales. Métodos de cuantificación. Método del estándar interno, del estándar externo y método del sobreagregado. Ventajas y desventajas de cada uno. Curvas de calibración. Cifras de mérito: límite de detección y de cuantificación, rango lineal, sensibilidad, especificidad, exactitud, precisión y robustez.
Módulo 6 (6 hs.): Roxana González
Ejemplos de aplicación. Discusión sobre la información cromatográfica obtenida. Discusión sobre el tratamiento de muestra y las condiciones aplicadas en la separación cromatográfica.

Modo de evaluación:

Se aprobará el curso mediante una instancia de evaluación de seguimiento formativa y otra de evaluación final. La evaluación formativa será considerada mediante la participación a las actividades involucradas en cada módulo.
Finalizado el curso, cada estudiante deberá rendir un examen-cuestionario de múltiple opción que aprobará con un puntaje igual o superior a 60%.

Destinatarios:

Estudiantes de posgrado y profesionales del área química, bioquímica, alimentaria y ciencias relacionadas. Se requiere que los inscriptos tengas conocimientos básicos de química analítica y estadística.