Conceptos básicos de Microscopía Electrónica de Transmisión (TEM) para el estudio de material biológico

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Docentes

  • Dra. Alfonsina Morales (responsable). Doctora en Bioquímica (UNSL). Servicio de Preparación de Muestras de EM. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza (IHEM)
  • Lic. María Paula López. Licenciada en Anatomía-Patológica (Univ. Maza). Servicio de Preparación de Muestras de EM. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza (IHEM)

Destinado a alumnos de posgrado y profesionales biólogos, bioquímicos, médicos, veterinarios, agrónomos y carreras afines. No se requiere experiencia previa en microscopía electrónica.

Carga horaria: solo teórico (carga horaria 15 horas) o teórico-práctico (carga horaria 45 horas)

Horario de cursado (sujeto a modificaciones): curso teórico: de lunes a viernes en la mañana / curso teórico- práctico: lunes a viernes 8 horas diarias a definir y sábado en la mañana.

Tópicos a tratar

  • Fundamentos de la formación de imágenes en TEM. Ventajas del uso del TEM en el estudio material biológico. Resolución y magnificación. Profundidad de campo y de foco.
  • Fijación: tipos de fijadores y buffers. Condiciones de osmolaridad, temperatura, pH y fuerza iónica. Deshidratación. Inclusión en resinas. Tipos de resinas: epoxi y metacrilatos. Polimerización. Ultramicrotomía. Tipo de grillas y cuchillas. Contraste de las secciones.
  • Procesamiento de tejidos biológicos en bloque. Comparación de las técnicas en muestras animales y vegetales.
  • Procesamiento de muestras en pellet. Células aisladas, organelas subcelulares, vesículas extracelulares. Técnica de pre-inclusión en agarosa. Procesamiento de monocapas celulares en cultivo.
  • Material particulado. Técnica de tinción negativa sobre film.
  • Manejo básico del TEM.
  • Nociones básicas de inmunolocalización, crioultramicrotomía, criofractura, tomografía y reconstrucción 3D.
  • Diseño experimental para un estudio de ultraestructura. Criterios de la obtención e interpretación de imágenes. Artefactos producidos en el procesamiento. Manejo básico de imágenes digitales. Mediciones y estadística. Limitaciones legales.
  • Nociones de seguridad en el laboratorio de microscopía electrónica.
  • Comparación de la información obtenida en TEM con la del microscopio electrónico de barrido (SEM), STEM, ambiental, FIB. Análisis elemental.

Modo de evaluación

Se aprobará el curso con un porcentaje de asistencia a las teorías y prácticas (a determinar). El examen final será la exposición oral de una publicación científica, con la interpretación del método seguido y de los resultados. El examen es individual ante todos los presentes.

Costo:  $6.500 (teórico, 15 hs) / $18000 (teórico-práctico, 45 hs) – Arancel para alumnos/as extranjeros: USS 120

 

Preinscripción aquí